Авторы

Изучена иммунотропная активность 11 промышленных микроорганизмов, принадлежащих к различным таксономическим группам, с целью гигиенической регламентации их в объектах окружающей среды. Апробирован и предложен комплекс информативных биомаркеров сенсибилизирующего эффекта, на основе этого разработана классификация штаммов-продуцентов по степени выраженности аллергизирующих свойств. Показано, что проявление иммунотропной, в том числе сенсибилизирующей, активности микроорганизмов-продуцентов, принадлежащих к различных таксономическим группам, наблюдается на разных уровнях хронического воздействия на макроорганизм.

Показана высокая информативность комплекса показателей для оценки функциональной активности тучноклеточной популяции и возможность использования его при гигиенической регламентации промышленных микроорганизмов. В отличие от тестов in vitro морфометрический анализ популяции тучных клеток (ТК) включает оценку не только секреторной активности отдельных клеток, но и функциональной активности популяции в целом. Характер наблюдаемых изменений тучноклеточной популяции не зависит от таксономической принадлежности штамма и способа введения в организм. Степень выраженности реакции ТК определяется концентрацией/дозой действующего фактора и способом введения.

Представлена характеристика функциональной активности тучноклеточной популяции при воздействии химических (4-бром-0-ксилол, пиракрил, мерказолил) и биологических факторов (биотехнологические штаммы) на фоне морфофункциональной оценки общетоксического и специфического действия этих факторов.

Показано, что показатели секреторной активности тучных клеток (фазы секреции, индекс дегрануляции и насыщения, структура пула дегранулированных клеток) характеризуют степень адаптации организма к воздействующему фактору, подчиняются дозовой зависимости и могут служить адекватной моделью для выявления вредных эффектов.

Показано, что при воздействии большинства изученных микроорганизмов (Bacillus, Rhodococcus, Aspergillus, Penicillium) развивается клеточная реакция дыхательных путей, характерная для воспалительного процесса. Она формируется за счет повышенной миграции нейтрофилов в назальном отделе, макрофагов, нейтрофилов и лимфоцитов — в бронхо-легочном отделе респираторного тракта. При этом происходит повышение микробоцидной активности фагоцитов, выявляемой в НСТ-тесте. Усиление действующего фактора вызывает более выраженную ответную клеточную реакцию. Предложено использовать показатели функционально-метаболической активности фагоцитов в качестве интегральных для оценки опасности биотехнологических штаммов и их гигиенического нормирования.

Проведено исследование иммунотропного эффекта 26 невирулентных биотехнологических штаммов, принадлежащих к различным таксономическим группам. Для статистической оценки характера неблагоприятного действия биотехнологических штаммов использованы t-критерий Стьюдента и корреляционный анализ. Показано, что использование различных статистических обработок результатов исследования позволяет получить не только информацию о значимых отличиях отдельных показателей состояния иммунной системы под действием биотехнологических штаммов, но и комплексно оценить взаимодействие лейкоцитарных клеток, участвующих в защите организма от воздействия микроорганизмов. Полученные данные возможно использовать при обосновании минимально эффективных концентраций биотехнологических штаммов.

В опытах на белых крысах установлены основные параметры токсикометрии силилхромата при однократном и повторном введении в желудок и интратрахеально. Характер биологического действия силилхромата при различных путях введения в организм и уровни действующих доз/концентраций аналогичны соединениям шестивалентного хрома. На основании этого обоснованы и утверждены ПДК силилхромата в воздухе рабочей зоны, ОБУВ в атмосферном воздухе населенных мест, ОДУ воды водоемов на уровне принятых в РФ величин для соединений шестивалентного хрома.

Проведен анализ современных данных, посвященных использованию и оценке биобезопасности промышленных микроорганизмов. На основе собственных экспериментальных данных по изучению характера вредного действия биотехнологических штаммов предложена классификация их по степени опасности, выявлена зависимость опасности штаммов от их таксономического положения. Обсуждаются перспективы исследования проблемы биобезопасности штаммов микроорганизмов, используемых в биотехнологиях.

В статье приведена оценка токсичности и опасности микроорганизма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32. На основании полученных данных для атмосферного воздуха населенных мест рекомендована ПДКа.в. штамма на уровне 5х103 кл/м3, 4 класс опасности.

Штамм Pseudomonas aureofaciens ВКМ-2391Д выделен из почвы вокруг ризосферы овса, не является генетически модифицированным штаммом. На основании проведенных исследований с учетом коэффициента запаса 10 для воздуха рабочей зоны предложена ПДКр.з. Pseudomonas aureofaciens ВКМ-2391Д на уровне 5х103 кл/м3, пометка А, 3 класс опасности. С учетом коэффициента запаса 100 для атмосферного воздуха населенных мест рекомендована ПДКа.в. Pseudomonas aureofaciens ВКМ-2391Д на уровне 5х102 кл/м3, пометка А, 3 класс опасности. Рекомендуемая для утверждения величина гигиенического норматива для Pseudomonas aureofaciens ВКМ-2391Д находится в соответствии с ранее утвержденными нормативами (ПДКр.з. 5000 кл/м3 и ПДКа.в. 500 кл/м3) для различных штаммов P.aureofaciens B-4117, P.fluorescens B-6844, P. fluorescens (denitrificans) B-99 и др.

Штамм Beauveria bassiana OPB-43 не обладает сенсибилизирующими свойствами, не оказывает влияния на клеточное и гуморальное звенья иммунной системы, на микрофлору кишечника. ПДК штамма в воздухе рабочей зоны рекомендована на уровне 5х104 мг/м3, в атмосферном воздухе населенных мест – 5х103 мг/м3.

Проведено изучение эмбрио- и фетотоксического действия, регистрируемого в антенатальном и постнатальном периодах развития при внутрижелудочном введении нового лекарственного средства Гестобутаноил в 2-х дозах (в эквитерапевтической и 10 раз выше). Установлено, что введение гестагена Гестобутаноил в 2-х дозах не оказывало влияния на массу тела беременных животных, которая продолжала прогрессивно увеличиваться в течение беременности. Выявлена дозовая зависимость в проявлении эмбриотропного эффекта гестагена. Введение гестагена в дозе 0.25 мг/кг (расчетная эквитерапевтическая доза) не оказывало неблагоприятного действия на развитие эмбриона и плода крыс. Воздействие гестагена в дозе 2.5 мг/кг (10 эквитерапевтических доз) оказывало негативное действие на течение беременности, которое проявлялось статистически значимым увеличением предимплантационной гибели и общей эмбриональной смертности, а также статистически значимым снижением количества плодов. Показано, внутрижелудочное введение лекарственной формы Гестобутаноил в дозах 0.25 и 2.5 мг/кг самкам крыс с 6-го по 19-ый дни беременности не оказывало негативного влияния на раннее развитие потомства первого поколения (постнатальная смертность, динамика массы тела, развитие сенсорно-двигательных рефлексов крысят).